為指導(dǎo)各地開展新冠病毒混采檢測(cè)工作，進(jìn)一步提升核酸檢測(cè)能力和效率，在已有10合1混采檢測(cè)技術(shù)的基礎(chǔ)上，針對(duì)新冠病毒核酸20合1混采檢測(cè)（20-in-1?test）技術(shù)（指將采集自20人的20支拭子集合于1個(gè)采集管中進(jìn)行核酸檢測(cè)的方法），制定本規(guī)范。

一、樣本采集耗材規(guī)格

（一）病毒采集管。管帽和管體應(yīng)當(dāng)為聚丙烯材質(zhì)，螺旋口可密封，松緊適度。管體透明，可視度好。采集管高度（含管帽）（100±5）mm，容量企業(yè)定標(biāo)20~30ml，內(nèi)含11~12ml胍鹽或其他有效病毒滅活劑的保存液。保存液應(yīng)當(dāng)帶有易于觀察、辨識(shí)的顏色（如粉紅色），并保持一定的流動(dòng)性，方便取樣。

（二）采集拭子。宜選用聚酯、尼龍等非棉質(zhì)、非藻酸鈣材質(zhì)的拭子，且柄部為非木質(zhì)材料。折斷點(diǎn)位于距拭子頭頂端3cm左右，易于折斷。

二、采集地點(diǎn)要求

選擇空曠、通風(fēng)良好的場(chǎng)地作為大規(guī)模人群篩查集中采集地點(diǎn)。根據(jù)原有場(chǎng)地條件，劃分為等候區(qū)、采集區(qū)、緩沖區(qū)和臨時(shí)隔離區(qū)，有效分散待檢人員密度。應(yīng)當(dāng)設(shè)置急救設(shè)備備用。

（一）等候區(qū)。設(shè)置人行通道，同時(shí)設(shè)置一米線保證等候人員的防護(hù)安全。根據(jù)天氣條件配備保溫、降溫，遮陽(yáng)、遮雨等設(shè)施。老年人、兒童、孕婦和其他行動(dòng)不便者優(yōu)先采集。

（二）采集區(qū)。根據(jù)氣候條件，配備帳篷、冷/暖風(fēng)扇、適量桌椅，保證醫(yī)務(wù)人員在相對(duì)舒適環(huán)境下工作。配備采集用消毒用品、拭子、病毒采集管，并應(yīng)當(dāng)為受檢人員準(zhǔn)備紙巾、嘔吐袋和口罩備用。標(biāo)本如無(wú)法及時(shí)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室，需準(zhǔn)備4℃冰箱或低溫保存箱暫存。應(yīng)當(dāng)制定防止病原微生物擴(kuò)散和感染的應(yīng)急預(yù)案。

（三）緩沖區(qū)。空間應(yīng)當(dāng)相對(duì)密閉，可供采集人員更換個(gè)人防護(hù)裝備，放置與采樣點(diǎn)規(guī)模相匹配的防護(hù)用品、采集用消毒用品、拭子和采集管，戶外消殺設(shè)備。

（四）臨時(shí)隔離區(qū)。用于暫時(shí)隔離在采集過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的疑似患者或高危人群。

三、采集流程

（一）標(biāo)識(shí)及信息登記。

1.登記流程。工作人員在采集前分配20個(gè)受檢者為一組，采集前收集并登記受檢者相關(guān)信息（包括姓名、性別、身份證號(hào)、聯(lián)系電話、采集地點(diǎn)、采集日期和時(shí)間），按照組別進(jìn)行采集管編號(hào)。因20人相對(duì)較多，為避免不同組人員弄混，采樣時(shí)，可采用2米線將下一組等候人員與正在采集的一組人員嚴(yán)格分隔開來(lái)，該組人員采完后，下一組人員才能有序進(jìn)入采樣區(qū)。

2.登記要求。推薦使用身份證讀卡器、二維碼條碼等信息化手段關(guān)聯(lián)受檢者信息，提高信息讀取效率和準(zhǔn)確性。

（二）采集方法。被采集人員頭部微仰，嘴張大，發(fā)“啊”音，露出兩側(cè)咽扁桃體，采集人員將拭子越過(guò)被采集人員舌根，在兩側(cè)咽扁桃體稍微用力來(lái)回擦拭至少3次，然后在咽后壁上下擦拭至少3次。操作完畢后，將拭子頭置入管中、拭子折斷點(diǎn)置于管口處，稍用力折斷使拭子頭落入采集管的液體中，棄去折斷后的拭子桿，旋緊管蓋，將采集管置于穩(wěn)定的置物架上。每例采集后采集人員均應(yīng)進(jìn)行手消毒。

（三）混合拭子。依照上述采集方法依次采集其余19支拭子，將完成采集的拭子放入同一采集管中，動(dòng)作輕柔，避免氣溶膠產(chǎn)生。連續(xù)采集20支拭子以后，旋緊管蓋，防止溢灑。注意咽拭子需浸入保存液內(nèi)。如采集管內(nèi)拭子不足20支，應(yīng)做好特殊標(biāo)記并記錄。

四、標(biāo)本送檢

（一）核對(duì)信息。核對(duì)采集管標(biāo)簽與混采登記表信息，確保準(zhǔn)確完整，編號(hào)一致。

（二）標(biāo)本放置要求。將核對(duì)后的采集管放入透明塑料密封袋（一層容器）中并封嚴(yán)袋口，用75%乙醇噴灑密封袋外部。將密封袋放入二層容器（可選內(nèi)配適量吸濕材料的包裝盒或雙層醫(yī)用垃圾袋），密封后用75%乙醇噴灑消毒。將二層容器放入具有“生物危害”標(biāo)識(shí)的專用標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)箱（推薦使用符合《危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》A類物品運(yùn)輸U(kuò)N2814標(biāo)準(zhǔn)的轉(zhuǎn)運(yùn)箱），二層容器和轉(zhuǎn)運(yùn)箱之間應(yīng)當(dāng)放置降溫凝膠冰袋。二層容器應(yīng)當(dāng)固定在轉(zhuǎn)運(yùn)箱中，保持標(biāo)本直立。密封轉(zhuǎn)運(yùn)箱后，使用75%乙醇噴灑消毒，轉(zhuǎn)運(yùn)箱表面潔凈無(wú)污染。

（三）標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)要求。標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)運(yùn)箱應(yīng)當(dāng)由專門標(biāo)本運(yùn)送人員負(fù)責(zé)運(yùn)送。標(biāo)本應(yīng)當(dāng)在采集后2~4小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。不能立即送檢的，應(yīng)當(dāng)配備專門的冰箱或冷藏箱保存，并做好標(biāo)本接收、保存登記。標(biāo)本采集后24小時(shí)內(nèi)可置于4℃保存。

五、實(shí)驗(yàn)室接收

（一）標(biāo)本簽收。運(yùn)送和接收人員應(yīng)當(dāng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行雙簽收。接收人員檢查轉(zhuǎn)運(yùn)箱、二層容器有無(wú)破損。

（二）標(biāo)本打開。應(yīng)當(dāng)在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)打開轉(zhuǎn)運(yùn)箱，取出二層容器。在生物安全柜中打開二層容器，用75%乙醇噴灑或擦拭消毒后，取出密封袋，用75%乙醇試劑噴灑或擦拭消毒，并檢查是否密封完好。

（三）標(biāo)本檢查。取出采集管，檢查管壁是否有破損、管口滲漏等，確認(rèn)無(wú)破損、滲漏后用75%乙醇噴灑或擦拭消毒。如有破損、滲漏，應(yīng)當(dāng)立即停止操作，用吸水紙覆蓋后使用0.55%含氯消毒劑進(jìn)行消毒處理，做好不合格登記后銷毀。

（四）標(biāo)本保存。不能及時(shí)檢測(cè)的標(biāo)本放入專用冰箱保存。24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)的標(biāo)本可置于4℃保存。24小時(shí)內(nèi)無(wú)法檢測(cè)的標(biāo)本應(yīng)當(dāng)置于-70℃或以下溫度保存。如無(wú)-70℃保存條件，則于-20℃暫存。避免標(biāo)本反復(fù)凍融。設(shè)立專庫(kù)或?qū)９癖４鏄?biāo)本，雙人雙鎖管理。

（五）轉(zhuǎn)運(yùn)容器移出。使用后的二層容器內(nèi)外壁經(jīng)75%乙醇擦拭消毒后移出生物安全柜，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后使用紫外燈照射消毒。

六、標(biāo)本檢測(cè)與質(zhì)量控制

按照《醫(yī)療機(jī)構(gòu)新冠病毒核酸檢測(cè)工作手冊(cè)（試行第二版）》相關(guān)要求執(zhí)行。

七、檢驗(yàn)結(jié)果處理

?新冠病毒核酸定性檢測(cè)報(bào)告應(yīng)當(dāng)包括檢測(cè)結(jié)果（檢出/陽(yáng)性、未檢出/陰性）、方法學(xué)、檢測(cè)限等。

（一）結(jié)果判斷。依據(jù)所用擴(kuò)增試劑說(shuō)明書，判斷檢測(cè)結(jié)果為未檢出/陰性或者檢出/陽(yáng)性。

（二）陽(yáng)性結(jié)果復(fù)核。

1.混采檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性、灰區(qū)或單個(gè)靶標(biāo)陽(yáng)性，通知相關(guān)部門對(duì)該混采管的20個(gè)受試者暫時(shí)單獨(dú)隔離，并重新采集單管拭子進(jìn)行復(fù)核。

2.復(fù)核單管核酸檢測(cè)如均為陰性，則按照陰性結(jié)果回報(bào)。暫時(shí)隔離人員即解除隔離；如檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性，按程序上報(bào)。

八、檢測(cè)后樣本處理

檢測(cè)后的標(biāo)本處理按《全員新型冠狀病毒核酸檢測(cè)組織實(shí)施指南（第二版）》相關(guān)要求進(jìn)行。

九、技術(shù)人員基本要求

采樣人員和檢測(cè)人員要求應(yīng)滿足《醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測(cè)工作手冊(cè)（試行第二版）》要求。

十、生物安全防護(hù)

標(biāo)本采集和運(yùn)送人員、實(shí)驗(yàn)室工作人員的防護(hù)按照《新型冠狀病毒肺炎防控方案（第八版）》相關(guān)要求進(jìn)行。